> Blogi > Tööstusuudised

Miks rakukultuur lüüsib kõigepealt punaseid vereliblesid?

2022-12-23

Põhiline sissejuhatus
Erütrotsüütide lüsaat on üks lihtsamaid ja lihtsamaid meetodeid punaste vereliblede eemaldamiseks, see tähendab punaste vereliblede lõhustamiseks lüsaadiga, mis ei kahjusta tuumarakke ja suudab punaseid vereliblesid täielikult eemaldada. Lüsaadi lõhustamine on leebe punaste vereliblede eemaldamise meetod, mida kasutatakse peamiselt ensüümi seedimise teel hajutatud koerakkude eraldamiseks ja puhastamiseks, lümfotsüütide eraldamiseks ja puhastamiseks ning punaste vereliblede eemaldamiseks koevalgu ja nukleiinhappe katsetes. happe ekstraheerimine. Punaste vereliblede lüsaadiga saadud koerakud ei sisalda punaseid vereliblesid ja neid saab edasi kasutada primaarseks kultuuriks, rakkude liitmiseks, voolutsütomeetriaks, nukleiinhappe ja valgu eraldamiseks ja ekstraheerimiseks jne.

Kasutusjuhend
Koeraku proov
1. Värsked koed seediti pankrease/ensüümi või kollagenaasiga ja dispergeeriti üksiku raku suspensiooni ning supernatant visati ära tsentrifuugimisega.

2. Võtke ELS-i lüsaat külmkapist temperatuuril 4 °C, lisage ELS-lüsaat rakusademele vahekorras 1:3-5 (lisage 3-5 ml lüsaati 1 ml tihendatud rakule), puhuge õrnalt ja segage.

3. Tsentrifuugige kiirusel 800-1000 p/min 5-8 minutit ja visake ülemine punane selge vedelik ära.

4. Sadestunud osa koguti ja tsentrifuugiti Hanki lahusega või seerumivaba kultuurilahusega 2-3 korda.

5, kui pragunemine pole täielik/täielik, võib korrata samme 2 ja 3.

6. rakkude resuspendeerimine järgmisteks katseteks; Kui RNA ekstraheeritakse, on kõige parem teha seda etapis 4 valmistatud lahuses, kasutades DEPC vett

Punaste vereliblede elutsükkel on väga lühike, ainult 120 päeva, kuid nad paljunevad verd väga kiiresti ja sel juhul on nad eriti võimelised rakkude jagunemiseks ja nad on kõige kiiremini jagunevad rakud, seega on see rakk väga väärtuslik, seega on see rakukultuuri jaoks väga kasulik. See on väga lihtne, selles pole organelle, ainult rakumembraane ja valke.

Eelmine:Millised on ELISA komplekti funktsioonid?

Edasi:Nõuded reaktiividele ja lahuse kontsentratsiooni põhikujutis.