Õige kultuurivara valimine on optimaalse rakkude kasvu ja katsetulemuste tagamiseks ülioluline. Rakukultuuri anumate valimisel on oluline arvestada selliste teguritega nagu rakutüüp, teie kultuuri spetsiifiline eesmärk, kultuuri ulatus, söötme tüüp, anumate materjal ja suurus, pinnatöötlused, kaaned gaasivahetust ja nende ühilduvust teie laboriseadmetega.
Siin on peamised tegurid, mida õige rakukultuuri anuma valimisel arvestada
1. Valige rakukultuuri anum vastavalt rakkude tüübile
Kleepuvad rakud
Need rakud vajavad pinda, mille külge kinnituda ja laiali laotada. Kleepuvate rakkude jaoks on vaja anumaid, mille pindala annab piisavalt ruumi rakkude kinnitumiseks ja kasvuks.
Näited Koekultuuriga töödeldud kolvid, Petri tassid ja mitme süvendiga plaadid.
Suspensioonirakud
Need rakud kasvavad söötmes hõljudes, seega pinda ei arvestata.
Näited
Kudekultuuri kolvid, spinner kolvid või bioreaktorid suuremahuliste suspensioonkultuuride jaoks.
2. Valige rakukultuuri anum suuruse (mahumahu) alusel.
Väikesemahulised kultuurid
Väikesemahuliste katsete või suure läbilaskevõimega sõelumise jaoks sobivad väiksemad anumad ideaalselt.
Näited Mitme süvendiga plaadid (6, 24, 96 raku kultuuriplaadid),
Petri tassidvõi T25 kolvid.
Suuremahulised kultuurid
Kui teil on vaja kasvatada suures koguses rakke, on parem kasutada suuremaid anumaid või bioreaktoreid.
Näited T75 ja T175 rakukultuuri kolvid, bioreaktorid või tsentrifuugimiskolvid rakukultuuride suspensiooni jaoks.
3. Valige rakukultuuri anum pinnatöötluse põhjal
Koekultuuriga töödeldud pinnad
Veresooned on eelnevalt töödeldud, et soodustada rakkude kinnitumist, muutes need sobivaks kleepuvate rakutüüpide jaoks. Need on tavaliselt kaetud selliste ainetega nagu kollageen, fibronektiin või muud rakuvälise maatriksi komponendid.
Töötlemata pinnad
Ideaalne suspensioonkultuuride jaoks või siis, kui rakud ei pea pinnale kleepuma. Neid kasutatakse tavaliselt söötmes vabalt kasvavate rakkude jaoks.
4. Valige rakukultuuri anum materjali põhjal
Polüstüreen, mida kasutatakse tavaliselt standardsete rakukultuuride jaoks. See on läbipaistev, võimaldades hõlpsat visuaalset kontrolli ja töötab hästi nii kleepuvate kui ka suspensioonirakkude puhul.
Polükarbonaati või polüpropüleeni kasutatakse teatud bioreaktorirakendustes ja anumates, mis nõuavad suuremat paindlikkust või spetsiifilist pinnatöötlust.
Klaas, mida kasutatakse standardse koekultuuri jaoks, võib kulude ja purunemisvõime tõttu sobida spetsiifiliste rakenduste või suuremahuliste kultuuride jaoks.
Kolvid
Üldise rakukultuuri jaoks kasutatakse tavaliselt T-kolve (T25, T75, T150). Lame pind annab hea ala rakkude kinnitumiseks ja kasvuks. Neid saab kasutada nii adherentsete rakkude kui ka suspensioonkultuuride jaoks, kui säilitatakse sobivad tingimused.
Petri tassid
Levinud väikesemahuliste kultuuride ja vaatlust nõudvate katsete jaoks, nagu kolooniate moodustumise testid.
Mitme süvendiga plaadid
Need on kasulikud suure läbilaskevõimega sõelumiseks ja väiksema ulatusega katseteks. Taldrikud 6, 12, 24, 48,
96Saadaval on 384 süvendit ja need sobivad ideaalselt rakupõhisteks analüüsideks, tsütokiinide vabastamiseks, ravimite testimiseks ja muudeks suure läbilaskevõimega rakendusteks.
Spinner kolvid
Kasutatakse rakukultuuride suspensiooni jaoks, eriti suuremates kogustes, kus rakkude kasvu säilitamiseks ja rakkude kokkukleepumise vältimiseks on vajalik kontrollitud segamine.
Bioreaktorid
Suuremahulise suspensioonikultuuri puhul võimaldavad bioreaktorid keerukamat kontrolli keskkonnatingimuste (nt pH, temperatuur, hapnikuga varustamine) üle ja neid kasutatakse suuremahuliseks tootmiseks, näiteks biofarmatseutilises tootmises.
6. Valige rakukultuuri anum steriilsuse ja ventilatsiooni alusel
Steriilsus
Saastumise vältimiseks veenduge, et anum on steriilne või steriliseeritud. Enamik kaubanduslikke kultuurianumaid on eelnevalt steriliseeritud, kuid kontrollige alati pakendit.
Ventilatsioon
Mõned anumad, näiteks kolvid, on varustatud õhutatavate korkide või filtritega, mis võimaldavad õhuvahetust, vältides samas saastumist. See on oluline rakkude kasvatamisel suure tihedusega tingimustes.
7. Valige rakukultuuri anum kasutusmugavuse järgi
Autoklaavitav vs ühekordne
Mõningaid kultiveerimisnõusid saab korduvkasutamiseks autoklaavida (nt klaaspudelid, teatud plastkolvid), teised on ühekordsed ja ühekordselt kasutatavad (nt plastist Petri tassid, mitme süvendiga taldrikud).
Käitlemine ja transport
Mõelge rakkude laevade vahel ülekandmise lihtsusele. Näiteks võivad mitme süvendiga plaadid vajada spetsiaalseid plaate, et neid oleks lihtne käsitseda selliste seadmetega nagu automatiseeritud pipetid.
8. Valige rakukultuuri anum söötme mahu põhjal
Valige anum, mis mahutab soovitud koguse söödet ilma ressursse raiskamata. Suuremahulise kultuuriga töötamisel võib osutuda vajalikuks suuremad kolvid või bioreaktorid, samas kui väiksemad mahud sobivad rakukultuuri nõudele või taldrikutele.
9. Valige rakukultuuri anum kulukaalutluste põhjal
Ühekordne vs korduvkasutatav
Ühekordselt kasutatavad plastanumad on kulutõhusad ja vähendavad saastumise ohtu, kuid suuremahuliste toimingute puhul võivad need olla kulukad. Korduvkasutatavate klaasanumate eelhind on suurem, kuid neid saab mitu korda steriliseerida ja taaskasutada, muutes need pikaajaliseks kasutamiseks säästlikumaks.
Helitugevuse efektiivsus
Materjalide raiskamise vältimiseks veenduge, et anuma suurus oleks sobiv, eriti kui kasutate kalleid kasvusöötmeid või reaktiive.
10. Valige rakukultuuri anum konkreetsete rakendusnõuete alusel
Pildistamine
Kui teil on vaja rakke mikroskoobi all visualiseerida, valige optiliselt selgete materjalidega anumad ja sobivate mõõtmetega anumad oma kujutise seadistuseks (nt mitme süvendiga plaadid suure sisaldusega sõelumiseks või klaaspõhjaga nõud elusrakkude pildistamiseks).
Kontrollitud agitatsioon
Suspensiooniga rakukultuuride puhul kaaluge spinner-kolbe või bioreaktoreid, mis tagavad kontrollitud segamise, et hoida rakud ühtlaselt suspendeeritud.
Järeldus
Õige rakukultuuri anuma valimine nõuab mitme teguri, sealhulgas rakutüübi, kultuuri skaala, materjalide ühilduvuse ja konkreetsete eksperimentaalsete vajaduste tasakaalustamist. Kleepuvad rakud vajavad kinnitumist soodustavaid pindu, samas kui suspensioonrakud saavad kasu suuremast mahust ja segamisest. Väikesemahuliste tööde jaoks võib piisata mitme süvendiga plaatidest või T-kolbidest, suuremate kultuuride jaoks võib vaja minna tsentrifuugimiskolve või bioreaktoreid. Veenduge alati, et anumad vastavad teie steriilsus- ja käitlemisnõuetele, ning arvestage kuluefektiivsusega, mis põhineb teie kasutusel.
Neid tegureid arvesse võttes saate valida optimaalse anuma, mis tagab teie rakukultuuri ja katseeesmärkide jaoks õiged tingimused.